聚合酶链式反应（PolymeraseChainReaction,PCR），是用DNA聚合酶在体外对特定的DNA片段进行快速扩增的方法。
该方法特异性高、敏感性强、操作简单、快速，不通过活细胞，在数小时内可使几个拷贝的模板序列甚至一个DNA分子扩增10~109倍，现已广泛应用到分子生物学研究的各个领域。
知名期刊PCR实验投稿要求
1. Nature系列期刊
原文要求：
"qPCR data must include primer sequences (with validation), amplification efficiency (90–110%), Ct values for all replicates, and MIQE guideline compliance. Normalization must use validated reference genes."
来源：Nature Methods Guidelines
关键要求：
引物序列+验证数据（如BLAST结果）
扩增效率（标准曲线法计算）
遵守MIQE指南
内参基因稳定性报告（如geNorm分析）
2. Cell系列期刊
原文要求：
"Provide raw Ct values, melt curves for specificity, primer sequences, and statistical methods. Biological replicates must be clearly stated."
来源：Cell Author Instructions
关键要求：
原始Ct值表格
熔解曲线证明单一峰值
生物重复≥3次（非技术重复）
3. Journal of Biological Chemistry (JBC)
原文要求：
"qPCR studies require amplification plots, primer efficiencies (R²≥0.98), and gel electrophoresis of PCR products. Data from ≥3 independent experiments must be shown."
来源：JBC Editorial Policies
关键要求：
扩增曲线图+产物电泳图
线性回归系数R²≥0.98
4. 《细胞与分子免疫学杂志》
原文要求：
"RT-qPCR需提供内参基因名称、引物序列、退火温度及循环数。数据须基于≥3次独立实验，并标注统计学差异（*p<0.05, **p<0.01）。"
参考链接：投稿指南
关键要求：
独立实验次数明确
统计学显著性标注
5. 《中国细胞生物学学报》
原文要求：
"PCR数据需包含引物序列、退火温度、产物大小及电泳图。定量结果需提供原始Ct值及标准化方法。"
来源：作者指南
关键要求：
凝胶电泳验证产物特异性
原始数据可追溯（如Excel表格）
6. 期刊特殊要求对比表
1. 实验设计阶段
2. 数据采集规范
必需参数：
① 扩增效率：90–110%（计算方式：*E = [10^{(−1/slope)} − 1]×100%*）
② R²值：≥0.98（标准曲线线性度）
③ Ct值变异系数（CV）：技术重复间<0.5
3. 核心经验总结
数据可重现性：
① 保存所有原始数据（仪器导出文件、凝胶图原始照片）。
② 记录试剂批号与仪器型号（如Applied Biosystems 7500）。
MIQE清单自查：
① 使用MIQE指南清单核对26项必填信息。
② 重点检查：RNA质量（RIN≥7）、cDNA合成方法（含gDNA去除）。
中文期刊特殊要求：
① 提供伦理委员会批准编号（涉及人类/动物样本）。
② 引物序列需标注合成公司。
1. 常见问题及解决方法
2. 投稿前终极检查清单
① 引物信息：序列、浓度、退火温度、扩增产物大小
② 验证文件：熔解曲线图、标准曲线图、电泳图
③ 统计数据：ΔΔCt计算过程、ANOVA分析结果、个体数据点
④ 伦理声明（如适用）：批准编号、遵守《赫尔辛基宣言》
重要提示：Nature/Cell期刊可能要求提供qPCR仪原始输出文件（如.eds或.rdml格式），建议使用RDML标准格式保存数据。
通过严格执行上述指南，可显著提升稿件接收率，并确保实验结果的可重复性与学术诚信。
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2. 三重质控：扩增效率≥95%｜R²>0.99｜内参基因稳定性分析（geNorm）
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