类器官整装免疫荧光染色（Whole-mount immunofluorescence）能够保留类器官完整的三维结构，配合共聚焦Z-stack，可以观察标志蛋白在类器官内部的空间分布。整装染色的核心难点从来不是“染出荧光”，而是在保持三维结构完整的前提下，让抗体均匀渗透到类器官内部。本文按实验流程拆解操作标准、调参逻辑与高频问题解决方法。
Co-IP（Co-immunoprecipitation，共免疫沉淀）常用于验证蛋白是否存在于同一复合物中。但真正做实验时，常见的却是两个极端：目标蛋白在WB里条带很清楚，到了IP却拉不下来；或者IP有信号，但背景重、IgG组也有条带，结果很难解释。
90% 癌症死亡源于转移，现有模型各有短板；系统分级动物体内模型→3D 体外培养模型，按复杂度、基因组保真度、免疫完整性、转移模拟能力分层对比，提出多模型联合是解决临床前向临床转化 “死亡谷” 的核心方案。
近年来，铁死亡受到肿瘤研究领域的关注，一个重要原因是：部分经历治疗选择、表型转换或代谢重编程的肿瘤细胞，虽然对传统治疗不再敏感，却可能更加依赖SLC7A11、GPX4和FSP1等抗铁死亡系统。围绕这些代谢弱点开展联合干预，为清除耐药细胞提供了新的研究思路。
铁死亡实验离不开诱导剂和抑制剂，但不同工具作用的位置并不相同。Erastin抑制System Xc⁻，RSL3直接影响GPX4，FINO₂则同时涉及铁氧化和脂质过氧化；Fer-1与DFO虽然都能挽救铁死亡，但保护机制完全不同。
本模型由：分化HepaRG肝细胞（80%）、LX-2肝星状细胞（10%）、原代人M1型巨噬细胞（10%）3种细胞无支架共组装形成三维人肝类器官（命名HML）；通过硬脂酸+油酸复合脂质慢性暴露诱导复现MASLD（原NAFLD）脂肪变性、炎症、纤维化三联病理特征，可用于健康肝脏与脂肪肝病理背景下的药物肝毒性高通量/多组学评价。
铁死亡研究中常见这样的判断：处理后GPX4下降、MDA升高，于是得出“细胞发生铁死亡”的结论。问题在于，这些变化并不具有足够的特异性。目前并不存在一个能够单独定义铁死亡的分子标志物。较为可靠的判断应建立在一条完整证据链上：细胞死亡发生 → 脂质过氧化增强 → 死亡具有铁依赖性 → 铁死亡抑制剂可以挽救 → 其他死亡方式不能充分解释
铁死亡是一种以铁依赖性脂质过氧化为核心特征的调控性细胞死亡。它并不是“铁增加”或“GPX4下降”造成的单一路径结果，而是活性铁、膜脂底物和抗氧化能力共同失衡后的结局。
炎症性肠病（IBD）作为全球高发的慢性消化系统疾病，影响着全球约0.3%-0.5%的人口，涵盖克罗恩病（CD）与溃疡性结肠炎（UC）两大核心类型。遗传、环境、饮食、免疫等多重因素共同参与疾病发生发展，而肠道微生物组是连接这些因素的重要调控环节。
